00022
Противочумная станция Крым, Симферополь

Методическое сопровождение

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и

благополучия человека

Федеральное государственное казенное учреждение здравоохранения

«Противочумная станция Республики Крым»










Информационное сообщение






ОТбор материала от людей для исследования на холеру














г. Симферополь, 2023 г.


Отбор и доставка материала на исследование

Материал от больного отбирает медицинский персонал лечебного учреждения, немедленно после выявления больного и до начала лечения антибиотиками (при необходимости возможно бактериологическое исследование материала и от лиц, принимавших антибиотики, в этом случае материал от больного уже в лаборатории засевают в 200-300 мл 1% пептонной воды (широкогорлые колбы) и на 2 чашки щелочного агара, при этом в направлении в графе «примечание» необходимо указать прием антибиотиков).

Материал для бактериологического исследования: испражнения, рвотные массы, желчь, трупный материал (отрезки тонкого кишечника и желчный пузырь).

От больных тяжелой формой и с подозрением на холеру материал направляют в лабораторию нативным и в 1% пептонной воде. У больных легкими формами и средней тяжести материал помещают в пробирку с транспортной средой. Нативный материал забирают в количестве 10-20 мл (у больных легкими формами можно отбирать 1-2 г испражнений). В транспортную среду вносят 1-2 мл или 1-2 г материала на 5-6 мл среды.

При исследовании материала от больных с подозрением на заболевание холерой не допускается использование в качестве накопительной среды 1%-й пептонной воды с теллуритом калия.

Нативный материал для исследования должен быть доставлен не позже, чем через 2 ч после его взятия. При удлинении сроков доставки используют транспортные среды: 1%-я пептонная вода (рН 8,4 ±0,1).

Для отбора проб используют чистую стерильную посуду, не содержащую следов дез. растворов. Стерилизацию посуды и других средств забора материала проводят автоклавированием, сухим жаром или кипячением в 2%-м растворе пищевой соды.

На флаконах (пробирках) с пептонной водой, передаваемых в стационары для отбора проб, должна быть этикетка или надпись с указанием названия среды и даты ее приготовления.

Среды во флаконах или пробирках, закрытых ватно-марлевыми пробками, рекомендуется хранить не более 2-х суток при температуре не выше (10,0 ± 0,2)°С при условии сохранения их стерильности (МУК 4.2.3745-22 «Методы лабораторной диагностики холеры»).

Медицинские организации (с участием бактериологических лабораторий) составляют схемы отбора и доставки материала для исследования на холеру, в которых учитывают время отбора материала, сроки доставки в лабораторию, вид материала, цель исследования и др.)


Перечни предметов для отбора материала на холеру в ЛПО целесообразно комплектовать исходя из функций и оснащения каждого учреждения, используя:

- приложения №№ 20, 21 СП 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней»;

- МУК 4.2.3745-22 «Методы лабораторной диагностики холеры»;

- МУК 4.2.3746-22 «Организация и проведение лабораторной диагностики холеры в лабораториях различного уровня»

- приложение № 5 МУ 3.4.2552-09 «Организация и проведение первичных противоэпидемических мероприятий в случаях выявления больного (трупа), подозрительного на заболевания инфекционными болезнями, вызывающими ЧС в области санитарно-эпидемиологического благополучия»;

- приложения № 5 и № 6 МУ 3.4.1030-01 «Организация, обеспечение и оценка противоэпидемической готовности медицинских учреждений к проведению мероприятий в случае завоза или возникновения особо опасных инфекций, контагиозных вирусных геморрагических лихорадок, инфекционных болезней неясной этиологии, представляющих опасность для населения РФ и международных сообщений»;

- другие действующие документы.

При проведении плановых профилактических исследований на холеру в рамках текущего эпиднадзора, допускается односменная работа лаборатории.

При выявлении больного с подозрением на холеру!!! лаборатория (задействованная в проведении диагностических исследований на холеру) переводится на круглосуточный режим работы.

1. При круглосуточном режиме работы лаборатории материал забирают в нативном виде, в 5-10 мл 1%-й пептонной воды pH 8,4 +/- 0,1 (транспортная среда) или в 50 мл 1%-й пептонной воды pH 8,4 +/- 0,1 (1-я среда накопления).

2. При односменной работе лаборатории:

а) при взятии материала в 6.00-10.00 ч утра и доставке в бактериологическую лабораторию до 10 ч утра материал забирают в 5-10 мл 1%-й пептонной воды (транспортная среда) или в 50 мл 1%-й пептонной воды (1-я среда накопления).

б) при взятии материала после 10 ч утра и доставке в течение рабочего дня лаборатории материал забирают в 5-10 мл 1%-й пептонной воды (транспортная среда);

в) при взятии материала по окончании рабочего дня лаборатории и доставке в лабораторию до 10 ч утра следующего рабочего дня материал забирают в 5-10 мл 1%-й пептонной воды (транспортная среда);

г) при взятии материала в выходные для лаборатории дни и доставке материала до 10 ч утра следующего рабочего дня материал забирают в 50 мл 1%-й пептонной воды с теллуритом калия (транспортная среда).

При клиническом диагнозе «Холера?» материал от больного (умершего) дополнительно направляется в Федеральное государственное казенное учреждение здравоохранения «Противочумная станция Республики Крым» Роспотребнадзора (ул. Промышленная, д. 42, г. Симферополь, Республика Крым, 295023 тел. (978) 9689108, е-mail: krimpchs@mail.ru) для подтверждения (снятия) диагноза и корректировки объема противоэпидемических мероприятий (п.3.4. Порядка взаимодействия…, утвержденного Приказом Роспотребнадзора № 274 от 01.04.2015).

Допускается отбор материала от больного, подозрительного на холеру (испражнения, рвотные массы) медицинским работником на дому, по месту работы, в медицинском учреждении, в пункте пропуска через государственную границу, где выявлен больной.

Пробы (с транспортной средой) до отправки в лабораторию сохраняют при комнатной температуре (24,0±1,0)°С в биксах, ящике, шкафу и т.д. в специально выделенной комнате, закрывающейся на замок. Продолжительность сохранения проб в указанных условиях до 24 часов.

Для лабораторной диагностики холеры используют питательные среды, внесенные в Государственный реестр медицинских изделий и прошедшие контроль качества после приготовления (https://rroszdravnadzor.gov.ru/services/misearch - Государственный реестр медицинских изделий и организаций (индивидуальных предпринимателей), осуществляющих производство и изготовление медицинских изделий (в свободном доступе) (МУК 4.2.3745-22).


Правила отбора проб

Для отбора материала необходимо:

  1. Средства индивидуальной защиты (ПЧК IV и перчатки, при необходимости дополнить фартуком и нарукавниками, лицевым щитком, респиратором);

  2. Клеенка подкладная с поливинилхлоридным (ПВХ) покрытием для подготовки рабочей поверхности (одноразовая клеенка);

  3. Пробирки (флаконы) с 1%-й пептонной водой;

  4. Пропиленовый контейнер (60-100 мл) с завинчивающейся крышкой, стерильный – 2 шт. (или стерильные стеклянные банки с притертыми (завинчивающимися) крышками).

  5. Автоматическая пипетка на 5-10 мл с одноразовыми наконечниками (2 шт.) или (стерильная ложка (2 шт.) + стерилизатор с 2 % содовым раствором), или (стеклянная трубка с грушей (2 шт.) + стерилизатор с 2 % содовым раствором).

  6. Штатив для пробирок;

  7. Петля многоразовая стерильная или петля (зонд) ректальная полимерная (полипропиленовая) прямая стерильная;

  8. Стерильная (одноразовая) чашка Петри или стерильный лоток;

  9. Направление на исследование, согласно установленной формы – 2 шт. (два варианта направления;

  10. Пакет с застежкой молнией (полиэтиленовый пакет) – 5 шт. (для упаковки пробирки со штативом, флаконов, направлений и др.);

  11. Карандаш;

  12. Маркер по стеклу;

  13. Ножницы;

  14. Канцелярская липкая лента (или лейкопластырь) для заклеивания банок с притертыми крышками, транспортировочного контейнера (бикса);

  15. Контейнер (бикс) «Для транспортировки материала» и знаком «Биологическая опасность» с ветошью (ватно-марлевый валик) для предотвращения переворачивания, выливания содержимого и разбивания флаконов (пробирок) ;

  16. Стерилизатор с 2% содовым раствором для кипячения отработанных петель, ложек — если предусмотрено обеззараживание многоразовых петель в инфекционном отделении, а не в бак.лаборатории;

  17. Готовое дезсредство для дезинфекции поверхностей (желательно с действующим веществом на основе спирта) и салфетки (марлевые или хлопчатобумажные) 10 шт. или емкость с приготовленным дезраствором и марлевыми салфетками (10 шт.), или салфетки, пропитанные дезсредством для обработки рук в перчатках и поверхностей, в индивидуальной упаковке (10 шт.);

  18. Абсорбирующий материал (марлевые салфетки, фильтровальная бумага);

  19. Амортизирующий материал (воздушно-пузырьковая пленка или вставка-штатив);

  20. Пакеты (емкости) для отходов класса А и В – 2 шт. (по 1 шт. каждого вида).


Алгоритм отбора проб на холеру:

  1. Надеть защитную одежду (ПЧК IV и перчатки, при необходимости дополнить фартуком и нарукавниками, лицевым щитком, респиратором);

  2. Открыть бикс (ящик) и достать «Инструкцию по отбору материала»;

  3. Дальнейшие действия производить в соответствии с пунктами инструкции;

  4. Пункт 1: Проверить соответствие надетой защитной одежды;

  5. Пункт 2: Достать клеенку подкладную с поливинилхлоридным (ПВХ) покрытием для подготовки рабочей поверхности (одноразовую клеенку). Постелить на стол (кушетку), условно разделить её на «чистую» и «грязную» половины. Отбор нативного материала проводится с грязной половины.

  6. Пункт 3: Разместить все предметы укладки на «чистой» половине и перемещать на «грязную» по мере пользования предметами для отбора проб:

  7. Пункт 4: Вскрыть стерильную упаковку пропиленовых контейнеров (банок, ложек и др.)

  8. Пункт 5: Отработанную упаковку поместить в пакет для дальнейшей утилизации как медицинские отходы (Класс А);

  9. Пункт 6: Заполнить все графы направления карандашом в двух экземплярах.

  10. Пункт 7: Поставить фломастером (маркером) соответствующие номера направлений на пробирках (флаконах, пропиленовых контейнерах, банках).

  11. Пункт 8: Направление поместить в отдельный пакет и застегнуть застежку молнию (или обычный пакет завязать петлёй).

  12. Пункт 9: Направления закрепить снаружи контейнера (бикса) «Для транспортировки материала».

  13. Пункт 10: Раскрыть пакеты для упаковки штатива с пробирками (пропиленовых контейнеров, банок), и поместить в пакеты небольшое количество абсорбирующего материала;

  14. Убрать использованные предметы (чистые! – карандаш, маркеры, чистые бланки направлений и др.) обратно в бикс.

  15. Отбор материала на 1 % пептонную воду:

Пункт 11: стерильную петлю (зонд) смочить в пептонной воде (физиологическом растворе) и ввести закруглённым краем в прямую кишку на глубину 5-6 см. провернуть и перенести отобранный материал в пробирку (флакон) с 1% пептонной водой.

Пункт 12: пробирку с встроенной петлей закрыть и поставить в штатив; флакон закрыть пробкой, петли погрузить в 2 % р-р соды для кипячения или упаковать для дальнейшего обеззараживания аппаратным способом (одноразовые петли поместить в емкость для медицинских отходов (пакет для отходов Класса В)). Штатив с пробиркой (флакон) упаковать в полиэтиленовый пакет с адсорбирующим материалом;

  1. Отбор нативного материала:

  2. Пункт 13: В подкладное судно и емкость для сбора рвотных масс (без следов дезрастворов) поставить стерильные чашки Петри.

  3. Пункт 14: Отобрать из чашек Петри 10-20 гр. испражнений (рвотных масс). Перенести материал в контейнер (банку) непосредственно над судном (или стерилизатором), контейнер (банку) наклонить под углом 450 и вылить по внутренней поверхности контейнера (банки);

При использовании автоматической пипетки, для рвотных масс, промывных вод и кала использовать разные наконечники. Отработанные одноразовые наконечники поместить в емкость для медицинских отходов (пакет для отходов Класса В);

При использовании ложки, последнюю можно оставить в ёмкости с выделениями (при повторном использовании прокипятить в 2% растворе соды);

Стеклянные трубки с резиновой грушей прокипятить в 2% растворе соды;

  1. Пункт 15: Пропиленовые контейнеры (банки) закрыть (банки с притертыми крышками заклеить канцелярской липкой лентой (лейкопластырем);

  2. Пункт 16: Обработать снаружи пропиленовые контейнеры (банки) дезсредством (не хлорсодержащим). Видимое загрязнение снять салфеткой с дезсредством, обработать повторно. Отработанную салфетку поместить в емкость для медицинских отходов (пакет для отходов Класса В);

  3. Пункт 17: Обработать руки в перчатках дезсредством (по мере необходимости – при загрязнении биологическим материалом, а также перед началом упаковки пропиленовых контейнеров, банок, флаконов, штатива с пробирками);

Пункт 18: Поместить каждый пропиленовый контейнер (банку, флакон, штатив с пробирками) в отдельный пакет с абсорбентом (обычный полиэтиленовый пакет завязать петлёй);

  1. Пункт 19: Пропиленовые контейнеры (банки, флаконы, пробирки в штативе) в пакетах упаковать в контейнер (бикс) «Для транспортировки материала». При использовании стеклянных банок, для предотвращения переворачивания использовать амортизирующий материал (воздушно-пузырьковая пленка или др.). Заклеить контейнер (бикс) липкой канцелярской лентой (лейкопластырем). Обработать контейнер (бикс) дезраствором;

  2. Пункт 20: Обработать руки в перчатках дезсредством.

  3. Пункт 21: Убрать в бикс (ящик): оставшиеся предметы с чистой половины: ножницы, липкую канцелярскую ленту (лейкопластырь).

  4. Пункт 22: Оставшиеся предметы на «грязной» половине обработать дезсредством. Выждать время экспозиции. Автоматическую пипетку после экспозиции убрать в бикс (ящик). Емкость с медицинскими отходами класса В после дезинфекции утилизировать.

  5. Пункт 23: Многоразовые петли (ложки, стеклянные трубки с грушами) прокипятить в стерилизаторе с 2 % содовым раствором, затем вымыть под проточной водой.

  6. Пункт 24: Клеенку обработать (2-кратное протирание) дезсредством, свернуть, затем вымыть (одноразовую клеенку поместить в емкость для медицинских отходов (пакет для отходов Класса В). Остатки выделений больного засыпать сухим хлорсодержащим десредством.

  7. Пункт 25: Доставка материала в бактериологическую лабораторию осуществляется специальным транспортом медицинским работником в течение 2-х часов.


Информационное сообщение подготовлено специалистами отдела эпидемиологии ФГКУЗ «ПЧС Республике Крым» Роспотребнадзора: Зинич Л.С., Ситниковой А.Л., Василенко К.А.


.


Scroll to Top